2026年 04期
泽漆水提物改善免疫环境抑制肺部肿瘤结节生成的作用研究
靳旭辉;段文彬;陈兰英;黄玉清;陈亚娟;刘荣华;目的 探索泽漆水提物改善免疫环境抑制脂多糖(LPS)联合4-甲基亚硝胺基-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)诱导的小鼠肺部肿瘤结节的作用及机制。方法 将雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、泽漆水提物低、中、高剂量组(0.9、 1.8、 3.6)g/kg和阿司匹林组(20 mg/kg)共6组，25周后取材。通过HE染色和免疫组织化学染色法检测肺组织肿瘤病变情况，Western blot法检测肺组织中癌蛋白表达，实时荧光定量PCR和流式细胞术分别检测肺组织免疫相关分子mRNA水平和免疫细胞百分比，Western blot法检测调节免疫通路相关蛋白表达。结果 HE和免疫组织化学染色法显示LPS联合NNK诱导小鼠形成腺瘤型肿瘤结节，肺部甲状腺转录因子1(TTF-1)高表达，与模型组相比，泽漆给药组小鼠肺部肿瘤结节数量明显减少，原癌蛋白髓细胞增生原癌蛋白(c-Myc)、抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl2)表达下降、促凋亡蛋白Bcl2相关X蛋白(BAX)表达上升；肺组织免疫相关分子S100钙结合蛋白A9(S100A9)、环氧合酶2(COX2)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、 CXC趋化因子配体1(CXCL1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素10(IL-10)、 IL-4的mRNA水平显著下降；肺组织巨噬细胞百分比上升、髓源性抑制细胞(MDSC)百分比下降，脾脏中调节性T细胞(Treg)和MDSC百分比下降；程序性死亡配体1(PD-L1)、白细胞分化抗原47(CD47)、磷酸化核因子κB p65亚基(p-NF-κB p65)、磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)蛋白表达下降。结论 泽漆水提物可通过改善免疫环境有效抑制LPS联合NNK诱导的肺腺瘤结节生成，其机制可能与调控NF-κB和STAT3激活相关。
低强度超声联合5-氟尿嘧啶对人肝癌HepG2细胞的抑制作用及机制
鲁毅;张玮函;杨馥瑜;贾立敏;王鹤霏;关启颜;何子瞻;刘梅;吕岩红;目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)联合低强度超声(LIUS)对人肝癌HepG2细胞杀伤效应及其作用机制。方法 利用LIUS(频率1.0 MHz,强度0.5 W/cm2,占空比20%)联合5-FU作用于人肝癌HepG2细胞系，采用多功能酶标仪测定细胞内5-FU药物含量，MTT法检测肿瘤细胞活力，Annexin V/PI染色、流式细胞术检测细胞凋亡率，偏振光荧光法检测细胞膜的流动性，Western blot法与免疫荧光染色检测核苷转运蛋白1(ENT-1)及P-糖蛋白(P-gp)的表达水平，免疫荧光染色检测钙网蛋白(CRT)和细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达。结果 LIUS能够显著增强HepG2细胞内5-FU的积累。与无处理组或单独应用5-FU相比，LIUS联合5-FU可显著降低HepG2细胞的活性，增强细胞早期及总细胞凋亡率；显著增加了HepG2细胞膜的流动性；显著上调介导药物转运进入肿瘤细胞的ENT-1的表达并抑制参与药物外排蛋白P-gp的表达；免疫原性细胞死亡(ICD)标志物CRT外翻，HMGB1从细胞核释放到胞质和胞外。结论 LIUS促进5-FU在肝癌HepG2细胞中的药物累积；5-FU联合LIUS通过正向调控药物细胞内转运蛋白ENT-1和负向调控耐药蛋白P-gp的表达，明显增强5-FU对肝癌细胞HepG2的杀伤效应，并诱导细胞免疫原性死亡。
MiR-21靶向PDCD4调控骨肉瘤MG63细胞的增殖、凋亡和侵袭
王志鹏;张子茹;赵健;目的 微小RNA (miRNA)是一种大小约20～25个碱基的单链内源性小分子非编码RNA,在转录水平上对潜在靶点mRNA的表达进行调控。miRNA在许多恶性肿瘤中异常表达，这与肿瘤的发生发展密切相关，起到原癌基因或致癌基因的作用。研究发现，microRNA-21 (miR-21)是许多癌症中最常见的致癌基因之一。然而，miR-21在骨肉瘤中的功能尚未完全阐明。本研究拟探讨miR-21对骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法 使用生物信息学预测miR-21的潜在靶基因。通过实时定量PCR和Western blot法分别检测骨肉瘤MG63细胞中miR-21和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达水平。通过上调或抑制miR-21表达，检测细胞活力、细胞周期、凋亡相关生物学功能，双荧光素酶报告基因验证miR-21与PDCD4的靶向关系。结果 生物信息学预测人类PDCD4基因的3′-UTR区含有多个潜在的miRNA靶位点。实时定量PCR结果显示，miR-21表达水平在pcDNA3.1-miR-21组中高于pcDNA3.1组和balnk组。与blank组相比，miR-21的上调显著促进了骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭，同时抑制了细胞凋亡。荧光素酶报告基因实验证实PDCD4是miR-21的直接靶基因，miR-21与PDCD4呈负相关。结论 上调miR-21的表达通过抑制骨肉瘤MG63细胞内源性PDCD4水平促进细胞增殖、侵袭和抑制细胞凋亡，下调miR-21的表达抑制骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和促进细胞凋亡。因此，miR-21可能在骨肉瘤的发展过程中发挥致癌作用，并可能成为有效的治疗靶点。
MAPK轴介导的线粒体功能紊乱参与糖尿病性白内障的分子机制研究
王妍茜;衡盈盈;胥妍;陈娅兰;林梦怡;王贵渠;康刚劲;朱思泉;目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)介导的线粒体功能紊乱参与糖尿病性白内障(DC)的分子机制。方法 人晶体上皮细胞(LEC)永生系SRA01-04分为以下处理组：空白组(Con)、渗透对照组、高糖组(HG)、 HG联合sh-p38 MAPK组、 HG和sh-p38 MAPK联合oe-NC组、 HG和sh-p38 MAPK联合oe-Pink1组。Con组LEC暴露于正常葡萄糖浓度(5.5 mmol/L)中48 h;渗透对照组LEC暴露于5.5 mmol/L葡萄糖和49.5 mmol/L甘露醇中48 h;其他组LEC暴露于55 mmol/L葡萄糖中48 h以体外诱导DC模型。36只Sprague-Dawley大鼠分为对照组、 DC组和DC联合SB203580组，每组12只。在第12周对各组晶状体进行组织学分析。使用试剂盒测定氧化应激指标丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平、 ATP合酶活性、线粒体膜电位分析、线粒体DNA(mtDNA)拷贝数。通过Western blot法检测蛋白表达。结果 与Con组相比，HG组LEC中MDA、 ROS水平显著增加，SOD水平、 ATP合酶活性、 mtDNA拷贝数、 5, 5′, 6, 6′-四氯-1, 1′, 3, 3′-四乙基苯并咪唑羰花青碘化物(JC-1)红色(聚集体)/绿色(单体)比值显著降低。与HG组相比，HG联合sh-p38 MAPK组LEC中MDA、 ROS水平显著降低，SOD水平、 ATP合酶活性、 mtDNA拷贝数、 JC-1红色(聚集体)/绿色(单体)比值显著增加。与HG联合sh-p38 MAPK组相比，HG和sh-p38 MAPK联合oe-Pink1组LEC中ATP合酶活性、 mtDNA拷贝数、 JC-1红色/绿色比值显著降低。HG和sh-p38 MAPK联合oe-Pink1组LEC中PTEN诱导的激酶1(Pink1)、帕金蛋白(Parkin)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、剪切型半胱天冬酶-3(c-caspase-3)、细胞色素C(Cyt-C)蛋白水平较HG联合sh-p38 MAPK组显著增加，p62、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)蛋白水平较HG联合sh-p38 MAPK组显著降低。DC联合SB203580组大鼠前囊LEC中p-p38 MAPK表达较DC组显著降低。与对照组相比，DC组大鼠前囊LEC中ROS、 MDA水平和线粒体自噬相关蛋白(包括Parkin、 Pink1、 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、 c-caspase-3和Cyt-C)表达水平显著上调，SOD水平和p62、 Bcl2蛋白表达水平显著降低。SB203580治疗表现出相反的调节作用。结论 抑制p38 MAPK信号通过在体外和体内DC模型中下调Pink/Parkin通路，减轻了LEC线粒体功能障碍引起的氧化应激，改善了DC大鼠晶状体组织病理学改变。
贫血与类风湿关节炎的关联：一项横断面和孟德尔随机化研究
刘言文;许英明;张由群;王馨仪;贾俊峰;郑朝晖;张葵;目的 探讨贫血与类风湿关节炎(RA)的相关性，分析贫血对RA的潜在影响与因果关系。方法 首先基于美国国家健康与营养调查(NHANES)数据库构建逻辑回归模型评估贫血与RA的关联，并通过亚组分析验证结果的稳定性。在此基础上，采用孟德尔随机化(MR)方法探究贫血与RA的因果关系。结果 多变量逻辑回归分析显示，贫血和RA存在正相关(OR=1.21, 95%CI:1.05～1.40),亚组分析进一步证明了结果的稳定性。MR结果显示贫血和RA之间存在双向因果关系，未观察到水平多效性或异质性。结论 贫血和RA在多个层面上具有相关性和双向因果关系。
基于细胞成像技术的西部马脑炎病毒中和抗体评价方法的建立
崔云;蔡欣雨;张幼迪;宁玉莹;张罗苗缘;袁若栋;董阳超;殷松娜;雷迎峰;目的 基于细胞成像技术建立一种快速、高通量及可视化的西部马脑炎病毒(WEEV)中和抗体评价方法。方法 首先利用幼仓鼠肾细胞(BHK-21)扩增本课题组前期构建的重组病毒rVSV-WEEV-GFP并进行滴定。然后基于高通量细胞微孔板成像系统(Cytation5)对BHK-21、非洲绿猴肾细胞(Vero)和小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro2a)三种细胞系感染rVSV-WEEV-GFP后进行荧光强度检测，确定rVSV-WEEV-GFP感染效率较好的细胞系；分析rVSV-WEEV-GFP感染细胞在不同时间点、不同感染复数(MOI)、不同细胞密度下平均荧光强度值，以此优化并确定最佳检测条件，从而建立基于细胞成像技术的中和抗体检测方法。进一步利用该方法与传统的空斑减少中和试验(PRNT)对1株广谱中和抗体分别进行50%抑制浓度(IC50)测定，分析两种方法的一致性。最后利用该中和抗体评价方法对实验室前期制备的脑炎甲病毒抗体的中和活性进行评价。结果 Vero细胞为rVSV-WEEV-GFP感染效率较高的细胞系；最佳检测时间和MOI分别是36 h和0.0625;最佳细胞数为每孔1万个细胞；基于细胞成像技术的中和抗体检测方法和PRNT方法具有高度一致性；6株抗体中有3株抗脑炎甲病毒的抗体对于WEEV具有较好的中和活性。结论 本研究建立的基于细胞成像技术的中和抗体评价方法为筛选WEEV高中和活性抗体奠定了良好的基础。
非折叠蛋白反应调节免疫细胞功能及其机制
郑吉阳;王亚珍;惠子夜;彭颖钧;彭启;罗悦;陈丽华;非折叠蛋白反应(UPR)作为细胞应对内质网蛋白质稳态失衡的核心调控机制，主要由肌醇需求酶1α-X-box结合蛋白1剪接体(IRE1α-XBP1s)、蛋白激酶RNA样内质网激酶-真核翻译启动因子2亚基α-激活转录因子4(PERK-eIF2α-ATF4)和激活转录因子6(ATF6)三条信号通路构成。UPR通路的激活会影响免疫细胞的表型和功能，并参与多种免疫相关疾病的发生发展。本文系统综述了UPR在各类免疫细胞中的激活机制，并深入探讨UPR通路激活对免疫细胞存活、发育、分化和功能的调控作用，旨在为全面理解UPR在免疫应答和免疫相关疾病发生发展中的重要作用提供理论依据。
MST1激酶在肥大细胞介导的超敏反应中作用的研究进展
巴特苏荣·巴一娜;叶建荣;超敏反应是指机体接触抗原并致敏后，再次受到相同抗原刺激时表现出的敏感性增高的免疫反应。其中，由免疫球蛋白E (IgE)和肥大细胞介导的超敏反应称为Ⅰ型超敏反应。肥大细胞广泛分布于体内各种组织器官的结缔组织和黏膜层，是Ⅰ型超敏反应中的重要效应细胞。在这一过程中，肥大细胞再次与特异性过敏原蛋白接触时，IgE会与之交联，诱发细胞的激活并脱颗粒，随后产生组胺、细胞因子、趋化因子，以及新合成的花生四烯酸和多种蛋白质来调节Ⅰ型超敏反应。巨噬细胞刺激因子1(MST1)在细胞生物学过程中扮演着多种重要角色，涉及多种细胞的迁移凋亡、增殖、代谢和细胞骨架调控等领域。本综述将探讨MST1激酶的调控机制以及其对Ⅰ型超敏反应的影响，以期为过敏性疾病的机制和防控研究提供新的思路。
HLA-A*02与HLA-E共同提呈CD8+ T细胞抗原表位在感染性疾病中的研究进展
左佳佳;许晓悦;赵珂璇;张宇丝;张春梅;张赟;陈丽华;刘晓斌;马樱;人类白细胞抗原(HLA)在免疫应答中发挥着关键作用。其中，HLA-A*02作为经典HLA-Ia类分子，通过提呈内源性抗原表位激活CD8~+T细胞，从而在抗病毒免疫应答中发挥重要作用；而非经典HLA-Ib类分子HLA-E可通过与自然杀伤(NK)细胞表面CD94/NKG2结合，参与免疫稳态的调控。近年来研究发现，HLA-E同样能够提呈病原体及肿瘤等来源的抗原表位激活CD8~+T细胞，并且其提呈的肽段序列与HLA-A*02提呈肽段高度相似，提示HLA-A*02与HLA-E可能通过协同或竞争机制，共同参与CD8~+T细胞抗感染免疫应答。本文系统综述了HLA-A*02与HLA-E的结构特征及抗原提呈机制的异同，及其在感染性疾病中共同提呈病原体抗原表位的现象，深入探讨二者共同提呈抗原表位在宿主防御与免疫稳态维持中的可能作用。基于HLA-A*02与HLA-E共同提呈抗原表位来设计新型多肽疫苗，有望克服人群HLA多样性的局限，为建立更持久、更广泛的免疫保护提供理论依据和新的方向。
巨噬细胞胞葬作用在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展
冯淑敏;卞涛;肺巨噬细胞(LM)作为肺部重要的免疫效应细胞，具有清除凋亡细胞的功能，称为胞葬作用。胞葬作用是一个严密调控的生物学过程，涉及LM对凋亡细胞的识别、结合、吞噬和消化等多个环节，在维持肺部稳态、调控炎症反应中发挥着至关重要的作用。研究表明，慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的LM胞葬作用存在缺陷，并且这种功能障碍与COPD的慢性炎症、组织重塑和疾病进展密切相关。本文以LM胞葬作用为靶点，深入探讨COPD中胞葬作用障碍的分子机制及可能的干预策略，以期为COPD的防治提供新思路。